文献速递——微环境酶反应性甲氨蝶呤修饰槲皮素胶束治疗类风湿性关节炎

2024年4月，西安国际医学中心医院李艳东及山西中医药大学王颖莉团队关于类风湿性关节炎治疗的研究成果发表于International Journal of Nanomedicine。文中研究者开展了CIA大鼠模型的体内荧光成像实验，实验结果表明PVGLIG-MTX-Que-Ms胶束具有强靶向性、抗炎、软骨保护等多重积极效果，提供了一种新的药物递送系统，为RA治疗提供了新的方向。

研究背景：

类风湿性关节炎(RA)是一种慢性自身免疫性疾病，其特征包括滑膜炎症和关节破坏。尽管RA治疗药物有一定疗效，但通常会引起严重的副作用且价格昂贵。RA的病理特征包括滑膜增生、关节内缺氧、基质金属蛋白酶(MMP)表达上调以及活性氧(ROS)的过度积累，这些不良的微环境进一步加剧了激活的巨噬细胞浸润。因此，控制病变组织的微环境和靶向激活的巨噬细胞成为RA治疗的新靶点。

研究方法：

研究者合成了一种针对微环境的胶束（PVGLIG-MTX-Que-Ms），使用薄膜水合方法制备。

在炎症微环境中，PVGLIG被高表达的MMP-2裂解，PEG5000被去除，暴露出MTX，从而靶向巨噬细胞的激活，增强了Quercetin（Que）的富集。

通过体外测试药物胶束的细胞毒性、靶向性、抗氧化性和抗炎特性。

使用药物胶束治疗胶原诱导的关节炎（CIA）大鼠模型，并观察了体内靶向性、血清炎症因子表达、关节软骨的免疫组化以及免疫荧光染色的变化。

研究结果：

制备的胶束具有小粒径、均匀分布、良好的生物相容性和安全性，并能延缓药物释放。体外实验结果显示，PVGLIG-MTX-Que-Ms利用PVGLIG酶响应肽在炎症部位聚集，主动靶向激活的巨噬细胞，特异性释放药物，增强药物的抗炎效果，减少炎症相关标志物的表达。体内治疗和组织学分析显示，PVGLIG-MTX-Que-Ms在炎症关节部位聚集并长时间保留，显著减少了CIA大鼠的软骨损伤和骨破坏，抑制了RA的发展。

体内荧光成像实验：

为了评估不同胶束在大鼠关节处的靶向能力，研究者开展了CIA大鼠模型的体内荧光成像实验，通过勤翔IVScope 8200动物活体成像系统观察不同胶束在大鼠体内的分布和持续时间，方法如下：

1) 将荧光探针DiR（1,1-二十八烷基-3,3,3,3-四甲基吲哚三碳花青染料碘化物）加载到胶束中，形成DiR-Ms。

2) CIA大鼠静脉注射DiR-Ms, MTX-DiR-Ms, PVGLIG-MTX-DiR-Ms以及自由DiR，DiR的剂量为400μg/kg，每组3只大鼠。

3) 使用体内荧光成像系统（IVScope 8200, Clinx, China）在4, 8, 12, 24, 36, 48, 72小时对大鼠进行拍照。

实验结果显示，DiR-Ms和MTX-DiR-Ms在大鼠关节处的荧光信号和持续时间相似，而PVGLIG-MTX-DiR-Ms在大鼠关节处的荧光信号最强，持续时间最长。这表明PVGLIG-MTX-DiR-Ms具有良好的关节靶向能力，能够在关节处发挥较慢释放的效果。

该研究发现PVGLIG-MTX-Que-Ms胶束具有强靶向性、抗炎、软骨保护等多重积极效果，提供了一种新的药物递送系统，为RA治疗提供了新的方向。